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蛋白质结晶技术发展的艰难历程
科学家们研究蛋白质结晶技术花费了很长时间。1988年诺贝尔化学奖被授予三位德国科学家,蛋白质晶体培养板哪家好,原因是三个人通力合作,在世界上解析了一种膜蛋白——菌光合反应中心的高分辨率三维结构,它拉开了膜蛋白结构生物学的序幕,在生物学界影响非常大。之后,科学家们在基因组学和蛋白质组学领域不断取得新进展,可以作为潜在靶向的蛋白质的数量呈指数级增加,然而这些方法获得有用晶体的成功率不足20%。
2011年,英国帝国理工学院和萨里大学的科学家们使用一种“分子印迹聚合物(MIPs)”的材料,研发出了一种更有效的制造蛋白质晶体的方法。但是这种方法在结晶条件成分复杂,包含高盐,宽泛的酸碱区间等条件下,容易造成MIPs对蛋白质的印记作用失效。科研不断深入,技术不断迭代,目前,应用为广泛的晶体制备方法当属规模筛选,比如高通量蛋白质结晶筛选,蛋白质晶体培养板多少钱,即从成百上千个溶液条件中筛选出适合结晶的条件。据相关数据显示,目前的高通量蛋白质结晶筛选的成功率仅为15.6%,严重制约了蛋白质结晶技术在结构生物学领域的应用和发展。缺乏、广谱的蛋白晶体制备技术是目前结构生物学研究中的技术瓶颈。
近期,由深圳***技术研究院喻学锋研究员课题组研发的一种蛋白质结晶筛选添加剂——人工晶种混悬液打破了技术桎梏。新法的应用,能够让蛋白质晶体的结晶更简便,蛋白质晶体培养板,更科学,更完整。
蛋白结晶板过程
概括了蛋白质结晶的基本过程,阐述了蛋白质结晶的早期发展历程,重点介绍了蛋白质结晶的近期研究状况,主要包括:形核机理的研究,结晶条件的筛选和结晶技术的优化以及基于结构的设计技术.特别是对离子液体在蛋白质结晶过程中的应用及发展前景进行了讨论,
论述了国内外生物大分子(蛋白质,酶等)沉淀结晶的研究现状和进展,着重从结晶热力学,粒子聚集,结晶的成核与晶体生长,以及场的作用等方面阐述了蛋白质沉淀结晶过程的特定现象与可能的结晶机理,对蛋白质的沉淀结晶过程作了的描述,并提出未来研究方向,为蛋白质结构分析,新药设计,生化研究以及工业化生产提供一定的基础。
蛋白质晶体板相互作用
蛋白质分子的结构层次蛋白中的多肽链往往不是一个如图4图4所示完全伸展的链。L.C.鲍林和R.B.科里曾由氨基酸、小肽和有关化合物晶体结构的测定中归纳了肽键的键长、键角等。链中肽键N-C的键长为1.32埃,具有40%的双键成分,与周围四个键是共面的,且N-H和C=O具有反式构型。肽键因具双键成分而无旋转的自由,蛋白质晶体培养板价格,但它周围的每个Cα原子与相邻两个肽键中的氮和碳原子所形成的Cα-N和Cα-C单键都具有较大的回旋余地,从而一个多肽键可能存在于不计其数的构象或立体结构中,其中有些构象使未成键原子间形成较多较强的氢键并产生其他能使整个分子趋于稳定的相互作用。