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发布时间:2021-11-18 16:26:00 作者:博亚捷晶
蛋白质结晶原理
蛋白质的X射线结构分析首先要获得合适的单晶。蛋白质结晶学尚未发展成熟,尽管很受人亲睐,特别是受航天飞机中微重力实验 的激发。蛋白质结晶是一个反复试验的过程,蛋白质逐渐会从溶液中析出,杂质、晶核及其他未知因素对此过程有所影响。通常,蛋白质越纯,生长晶体几率越大。蛋白质结晶学者对蛋白质的纯度要求要严于生化学家的要求,后者往往在酶催化活性足够高时就很满意。另一方面,为了使蛋白质结晶,不仅要加其他成分,所有蛋白质分子的表面性质也必须是相同的,特别是表面的电荷分布,因为它影响晶体内分子的聚集。质谱是蛋白质结晶中的一种有效工具,例如检测重组蛋白的表达、样品纯度、重原子衍生物及蛋白质结构的特性。
蛋白结晶板概念
不能模拟形状分布,因为模型中的晶体尺寸被简单的定义为该晶体的体积当量直径.本提出了一个适用于蛋白质结晶过程的基于晶体形状结构的群体粒数衡算模型.在该模型中,蛋白质晶体的形状被定量描述为每个晶面到晶体几何中心的距离,由此提出了基于蛋白质晶形的多维粒度分布,即形状分布的概念.以溶菌酶结晶过程为例,对溶菌酶晶体结晶的热力学和动力学行为进行了分析和研究,应用非线性回归的方法,确定了四方系溶菌酶的结晶动力学方程参数.结合本提出的基于晶体形状结构的群体粒数衡算模型,质量衡算方程。
蛋白结晶板
提出了一个适用于蛋白质结晶过程的基于晶体形状结构的群体粒数衡算模型.在该模型中,蛋白质晶体的形状被定量描述为每个晶面到晶体几何中心的距离,由此提出了基于蛋白质晶形的多维粒度分布,即形状分布的概念.应用非线性回归的方法,确定了四方系溶菌酶的结晶动力学方程参数.结合本提出的基于晶体形状结构的群体粒数衡算模型。
温度控制作为调控蛋白质结晶过程的手段,在结晶实验中被广泛采用.热历史 效应作为蛋白质结晶实验中新的影响因素,已被越来越多的科学家所重视.控制温度可以改变蛋白质的溶解度,进一步改变溶液的过饱和度,从而影响结晶过程.我 们简要总结了温度对蛋白质结晶的影响及应用温度技术控制蛋白质晶体生长的各种技术,为蛋白质结晶工作提供理论和实验依据.。
尽管近些年来在蛋白质结晶的理论、方法和技术上已取得巨大发展,获得衍射良好的蛋白质晶体仍然是利用X-射线解析蛋白质结构的一个主要瓶颈问题。这里我们发展了一种新型的蛋白质结晶方法—固液界面方法,即SLIM。该方法主要包括两个部分1)预先加入并干燥蛋白质母液;2)进行晶体生长的时候,直接将蛋白质溶液加入'干母液'中,从而产生一个固体(干母液)和液体(蛋白质溶液)的界面。该方法不仅操作简单、快速,而且降低了对蛋白质溶液浓度的要求。
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